ژنتیک

تفسیر کاغذ و باندهای غیرمعمول تشکیل شده در وسترن بلات

باند های وسترن

 

باندهای ناصاف

🔹این باندها می‌تواند در نتیجه‌ی حرکت سریع پروتئین‌ها در ژل ایجاد شود.

پس زمینه زیاد

  • اغلب با غلظت بیش از حد آنتی بادی ایجاد می‌شود که می‌تواند به کاغذ PVDF متصل شود.
  • مشکل دیگر می‌تواند از بافر شستشو باشد که ممکن است خیلی قدیمی باشد. افزایش زمان شستشو می‌تواند به کاهش پس زمینه کمک کند.
  • بیش از حد قرار گرفتن کاغذ در معرض آنتی‌بادی می‌تواند منجر به این مشکل شود.

نقاط ناهموار و ناجور روی کاغذ

  • این نقاط در اثر انتقال نامناسب ایجاد می‌شود. اگر حباب‌های هوا بین ژل و کاغذ در هنگام ترانسفرینگ به دام افتاده باشد روی فیلم یا کاغذ ظاهر می‌شود. ‌
  • استفاده از یک شیکر برای همه مراحل انکوبه شدن مهم است. شستشوی دوباره از اهمیت بالایی برخوردار است تا بک گراند شسته شود.
  • این مشکل همچنین ممکن است ناشی از آنتی‌بادی‌های متصل به عوامل بلاکینگ باشد. در این مورد باید یک بافر بلاکینگ دیگر مورد آزمایش قرار گیرد. فیلتر کردن بافر بلاکینگ همچنین می‌تواند به حذف برخی از آلاینده‌ها کمک کند.
برچسب ها
نمایش بیشتر
دکمه بازگشت به بالا
بستن