بیوتکنولوژی

فرآیند کلی بیان و تخلیص پروتئین نوترکیب در باکتری به عنوان میزبان پروکاریوتی

باکتری

 

به دلیل ساده بودن روش و کم هزینه بودن، سامانه بیان اشرشیاکلای همچنان بعنوان پرکاربردترین سامانه بیانی باکتریایی و بعنوان اولین انتخاب برای تحقیقات آزمایشگاهی و توسعه اولیه محصول در فعالیت های تجاری مورد استفاده قرار می گیرد.

فرآیند کلی بیان و تخلیص پروتئین نوترکیب در باکتری

 

این فرآیند شامل مراحل زیر است، که در پست های بعدی در مورد هر مرحله بیشتر توضیح می دهیم:
برای تولید پروتئین نوترکیب ابتدا ژن مورد نظر را داخل وکتور (پلاسمید) بیانی کلون می کنیم، سپس وکتور را به داخل سلول میزبان منتقل می کنیم. به این فرآیند ترانسفورماسوین می گویند. بعد از رشد و تکثیر سلول میزبان، سلول ها را باید لیزکرد تا پروتئین های سلولی آزاد شوند. در مرحله بعد محلول حاوی پروتئین های سلولی و پروتئین نوترکیب را به ستون کروماتوگرافی منتقل می کنیم. پس از چند مرحله شستشو ستون، پروتئین های اضافی از ستون خارج می شوند و فقط پروتئین نوترکیب به ستون متصل باقی می ماند. در مرحله آخر با افزودن بافر elution به ستون، پروتئین نوترکیب از ستون خارج می شود.

برچسب ها
نمایش بیشتر

پاسخی بگذارید

نشانی ایمیل شما منتشر نخواهد شد. بخش‌های موردنیاز علامت‌گذاری شده‌اند *

1 × پنج =

دکمه بازگشت به بالا
بستن